DNáza I (bez RNázy) (2u/ul)
Kat. č.: HC4007B
DNáza I je endonukleáza, ktorá môže štiepiť jednovláknovú alebo dvojvláknovú DNA.Môže hydrolyzovať fosfodiesterové väzby za vzniku mono- a oligodeoxynukleotidov obsahujúcich 5'-fosfátovú skupinu a 3'-OH skupinu.Optimálny pracovný rozsah pH DNázy I je 7-8.Aktivita DNázy I závisí od Ca2+a môžu byť aktivované dvojmocnými iónmi kovov, ako je CO2, Mn2+, Zn2+atď. V prítomnosti Mg2+DNáza I môže náhodne štiepiť akékoľvek miesto dvojvláknovej DNA;Zatiaľ čo v prítomnosti Mn2+DNáza I môže štiepiť dvojvláknovú DNA na rovnakom mieste, pričom vytvára tupé konce alebo lepkavé konce s 1-2 vyčnievajúcimi nukleotidmi.Môže sa použiť na spracovanie rôznych vzoriek RNA.
Komponenty
| názov | 1KU | 5KU |
| Rekombinantná DNázaI (bez RNázy) | 500 ul | 5 × 500 μl |
| Reakčný pufer DNase I (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Podmienky skladovania
Tento produkt by sa mal skladovať pri teplote -25 ~ -15 ° C počas 2 rokov.Vyhnite sa opakovanému zmrazovaniu a rozmrazovaniu.
Inštrukcie
Aplikuje sa na odstránenie DNA zo vzoriek RNA len pre referenciu.
1. Na prípravu nasledujúceho reakčného systému použite centrifugačné skúmavky a špičky pipiet bez obsahu RNázy:
| Komponenty | Objem (μl) |
| Reakčný pufer DNase I (10×) | 1 |
| Rekombinantná DNasel (bez RNázy) | 1 |
| RNA | X |
| ddH bez RNázy2O | Až 10 |
2. Reakčné podmienky sú nasledovné: 37 °C, po 15-30 minútach, pridať konečnú koncentráciu 2,5 mM roztoku EDTA a dobre premiešať, potom 65 °C počas 10 minút.Spracovanú šablónu možno použiť na následné experimenty RT-PCR alebo RT-qPCR atď.
Poznámky
1. DNáza l je citlivá na fyzikálnu denaturáciu;Pri miešaní jemne otočte skúmavku adobre pretrepte, netraste silno.
2. Enzým by sa mal pri použití skladovať v nádobe na ľad alebo v ľadovom kúpeli a ihneď po použití by sa mal skladovať pri teplote -20 °C.
3. Tento produkt je určený len na výskumné účely.
4. Pre vašu bezpečnosť používajte laboratórne plášte a jednorazové rukavice.
