Poly A nosičová RNA
Kat. č.: HC4001A
Poly A, polyadenylát, je zmesou 100 ~ 10 000 polyadenylátov, ktoré sú polymerizované polynukleotid fosforylázou in vitro.In vivo sa poly (a) pridá na 3-koniec mRNA enzýmom, aby sa zlepšila stabilita mRNA.Pri aplikácii extrakcie nukleovej kyseliny môže pridanie poly A do lyzátu alebo väzbového roztoku zlepšiť výťažok DNA a RNA.Mechanizmuspoly A zlepšujúce výťažok nukleovej kyseliny je nasledovné:
1. Nasýtený kontakt s povrchovou adsorpciou predmetov.Väčšina polypropylénových výrobkov má na povrchu statickú elektrinu, ktorá bude adsorbovať nukleové kyseliny.Nosná RNA ich môže nasýtiťadsorpčné účinky a znižujú stratu cieľových nukleových kyselín.
2. Inaktivujte stopové nukleázy: V biologických vzorkách sú rôzne nukleázy aživotné prostredie.Poly A môže inaktivovať stopové nukleázy v krokoch extrakcie alebo konzerváciezlepšiť výťažok a stabilitu cieľových nukleových kyselín.
3. Koprecipitácia: V kroku purifikácie nukleovej kyseliny alkoholom sprostredkovanej precipitácie alebo väzby môže poly A koprecipitovať s cieľovou nukleovou kyselinou alebo vytvárať polymérne častice za vznikuzlepšiť zotavenie.
Podmienky skladovania
-20 ~ 8 ℃, suché skladovanie, dlhodobé skladovanie by malo byť umiestnené pri -20 ℃
Špecifikácia
Číslo CAS | 26763-19-9 |
Vzhľad | Biely lyofilizovaný prášok |
Čistota | 99 % |
Molekulová hmotnosť | 700-3500 kDa |
Spôsob použitia
Vezmite primerané množstvo lyofilizovaného prášku, pridajte vodu upravenú DEPC alebo roztok guanidínovej solirozpustite ho na 0,1-1 ug/ul a potom ho zabaľte a skladujte pri -20 °C.
Aplikácie
1. Extrakcia vírusovej DNA/RNA: pridanie 1-5 ug nosnej RNA do lyzátu môže zlepšiť výťažok RNA/DNA, stabilizovať cieľovú nukleovú kyselinu a zabrániť degradácii purifikovanej nukleovej kyseliny počas skladovania.
2. Pri extrakcii mikro DNA/RNA metódou kolónovej membrány (<1 ug) pridanie nosičovej RNA k 1-5 ug prispieva k zlepšeniu výťažku nukleovej kyseliny.
3. V kroku precipitácie a koncentrácie nukleovej kyseliny sprostredkovanej alkoholom je pridanie 1-2 ug nosičovej RNA užitočné na zlepšenie získania krátkeho segmentu RNA.
4. V reakčnom roztoku kvantitatívnej sondy PCR je pridanie 10-100 ng nosičovej RNA do reakčného roztoku užitočné na zlepšenie citlivosti a zníženie CThodnotu.