Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Popis
Kat. číslo: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix je multiplexná kvantitatívna PCR súprava založená na RNA ako templáte.V experimente sa reverzná transkripcia a kvantitatívna PCR uskutočňujú v rovnakej reakčnej skúmavke, čo zjednodušuje experimentálnu operáciu a znižuje riziko kontaminácie.Jedinečný dizajn zmesi pufra a enzýmov môže byť použitý v jednokrokovom lyofilizovanom systéme.Súprava využíva reverznú transkriptázu odolnú voči teplu na účinnú syntézu prvého vlákna cDNA s použitím hotstart Taq DNA polymerázy na kvantitatívnu amplifikáciu.Obsahuje optimalizovaný reakčný pufor, zmes enzýmov atď., a boli pridané faktory, ktoré účinne inhibujú nešpecifickú PCR amplifikáciu a zvyšujú účinnosť amplifikácie viacerých qPCR reakcií, čo umožňuje viacnásobnú fluorescenčnú kvantitatívnu amplifikáciu pri zabezpečení účinnosti amplifikácie primerov.
Komponenty
| názov |
| 1. Lyo-tlmivý roztok |
| 2. Lyo-enzýmová zmes |
| 3. Lyoprotektor |
Podmienky prepravyión
A: Lyo-pufer a ochranný prostriedok: -25~-15℃, trvanlivosť je 1 rok.
B: Lyo-enzýmová zmes, 2-8 ℃, trvanlivosť je 6 mesiacov.
Návod na obsluhu
1. Reakčný systém (ako príklad vezmite 25 μl)
| Komponenty | Objem (μl) | Konečná koncentrácia |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Lyo-enzýmová zmes | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Primer Mix (10μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Zmes sondy (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
| Šablóna RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Až do 25 | - |
2. Optimalizovaný cyklistický protokol
1) Štandardný cyklistický protokol
| Reakčná fáza | Teplota | čas | Cyklus | |
| 1 | Reverzná transkripcia | 50 °Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Počiatočná denaturácia | 95 °C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifikačná reakcia | 95 °C | 15 sek | 45 cyklov |
| 60 °Cb | 30 sekc |
2) Protokol rýchlej cyklistiky
|
| Reakčná fáza | Teplota | čas | Cyklus |
| 1 | Reverzná transkripcia | 50 °Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Počiatočná denaturácia | 95 °C | 2 sek | 1 |
| 3 | Amplifikačná reakcia | 95 °C | 1 sek |
45 cyklov |
| 60 °Cb | 13 sekc |
Poznámka:
a) Obrátený prepis: Teplotu je možné zvoliť 42°C alebo 50°C na 10-15 minút.
b) Amplifikačná reakcia: Teplota sa upravuje podľa hodnoty Tm navrhnutých základných náterov.
c)Fluorescencia signál akvizície: Nastavte experimentálny postup podľa požiadaviekmanuál k prístroju.
Technické informácie/špecifikácie
| Hot Start | Vstavaný horúci štart |
| Metóda detekcie | Detekcia primer-sonda |
| PCR metóda | Jednokroková RT-qPCR |
| Typ vzorky | RNA |
Poznámky
1. Tento produkt je určený len na výskumné účely.
2. Noste potrebné OOP, ako je laboratórny plášť a rukavice, aby ste zaistili svoje zdravie a bezpečnosť！
