2× PCR Super Mix (s farbivom)
2× PCR Master Mix obsahuje Taq DNA polymerázu, dNTP a ďalšie komponenty požadované pre PCR.Master Mix je stabilný 3 mesiace pri 4 °C s našimi prispôsobenými stabilizátormi.Predzmesový roztok je optimalizovaný pre konvenčnú PCR a pripravený na použitie pridaním templátu DNA a primerov.Produkty PCR možno naniesť priamo na elektroforézu s vopred naneseným farbivom brómfenolovej modrej.Amplifikované produkty obsahujú 3'-dA výbežok a môžu byť ľahko klonované do T vektora.2×PCR Master Mix zjednodušuje postup PCR a znižuje kontamináciu.
Podmienky skladovania
Výrobky by sa mali skladovať pri teplote -25 ℃ ~ -15 ℃ počas 2 rokov.
technické údaje
| Vernosť (vs. Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Previs | 3'-A |
| Polymeráza | Taq DNA polymeráza |
| Formát reakcie | SuperMix alebo Master Mix |
| Rýchlosť reakcie | Štandardné |
| typ produktu | PCR Master Mix (2x) |
Inštrukcie
1.Reakčný systém
| Komponenty | Objem(μL) |
| DNA šablóny | Vhodné |
| Primer 1 (10 μmol/l) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/l) | 2 |
| 2× PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | do 50 |
2.Amplifikačný protokol
| Cyklujte kroky | Teplota (°C) | čas | Cykly |
| Počiatočná denaturácia | 94 | 5 min | 1 |
| Denaturácia | 94 | 30 sek | 35 |
| Žíhanie | 50-60 | 30 sek | |
| Rozšírenie | 72 | 30 – 60 sekúnd/kb | |
| Záverečné predĺženie | 72 | 10 min | 1 |
Poznámka:
1) Použitie šablóny: 50-200 ng genómovej DNA;0,1-10 ng plazmidovej DNA.
2) Mg2+koncentrácia: Tento produkt obsahuje 3 mM MgCl2, vhodný pre väčšinu PCR reakcií.
3) Teplota žíhania: Pozrite si teoretickú hodnotu Tm primerov.Teplotu žíhania možno nastaviť o 2-5 °C nižšiu ako je teoretická hodnota základného náteru.
4) Čas predĺženia: Na molekulárnu identifikáciu sa odporúča 30 sekúnd/kb.Pre klonovanie génov sa odporúča 60 s/kb.
Poznámky
1.PCR produkty s 2× PCR Master Mix nie sú vhodné pre elektroforézu na polyakrylamidovom géli.
2.Pre vašu bezpečnosť a zdravie noste pri prevádzke laboratórne plášte a jednorazové rukavice.
3.Používa sa LEN na výskumné účely!
