Peroxidáza (zdroj chrenu) Synonymum: Oxidoreduktáza peroxidu vodíka;HRP

Chrenová peroxidáza (HRP) sa izoluje z koreňov chrenu (Amoracia rusticana) a patrí do feroprotoporfyrínovej skupiny peroxidáz.HRP sa ľahko spája s peroxidom vodíka (H2O2).Výsledný komplex [HRP-H2O2] môže oxidovať širokú škálu donorov vodíka:
Donor + H2O2 → Oxidovaný donor + 2 H2O
HRP oxiduje rôzne substráty (pozri tabuľku 1):
• Chromogénne
• Chemiluminiscenčné (ako je luminol alebo izoluminol)
• Fluorogénne (ako je tyramín, kyselina homovanilová alebo kyselina 4-hydroxyfenyloctová)
HRP je jednoreťazcový polypeptid, ktorý obsahuje štyri disulfidové mostíky.HRP je glykoproteín, ktorý obsahuje 18% sacharidov.Sacharidová kompozícia pozostáva z galaktózy, arabinózy, xylózy, fukózy, manózy, manozamínu a galaktozamínu, v závislosti od špecifického izozýmu.

HRP je široko používaná značka pre imunoglobulíny v mnohých rôznych imunochemických aplikáciách, vrátane imunoblotovania, imunohistochémie a ELISA.HRP sa môže konjugovať s protilátkami niekoľkými rôznymi spôsobmi, vrátane glutaraldehydu, oxidácie jodistanom, cez disulfidové väzby a tiež cez amino a tiolom riadené zosieťovacie činidlá.HRP je najžiadanejšou značkou pre protilátky, pretože je najmenšou a najstabilnejšou z troch najpopulárnejších enzýmových značiek (peroxidáza, β-galaktozidáza, alkalická fosfatáza) a jej glykozylácia vedie k nižšej nešpecifickej väzbe.Bol publikovaný prehľad metód konjugácie glutaraldehydu a jodistanu.

Peroxidáza sa tiež používa na stanovenie glukózy4 a peroxidov v roztoku.Niekoľko publikácií, 6-24 diplomových prác, 25-29 a dizertačných prác 30-46 citovalo použitie P8375 vo svojich výskumných protokoloch.