2× PCR Master Mix (bez farbiva)
PCR Master Mix je druh konvenčného PCR vopred namiešaného roztoku, ktorý je pripravený na použitie, vrátane Taq DNA polymerázy, dNTP zmesi MgCl2 a optimalizovaného pufra.Počas reakcie možno na amplifikáciu pridať iba primér a templát, čo značne zjednodušuje pracovné kroky experimentu.Tento produkt obsahuje vynikajúce stabilizátory a môže sa skladovať 3 mesiace pri 4 °C.Produkt PCR má 3'-dA výbežok a možno ho ľahko klonovať do T vektora.
Podmienky skladovania
Výrobok by sa mal skladovať pri teplote -25 °C ~ -15 °C počas dvoch rokov.
technické údaje
| Vernosť (vs. Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Previs | 3'-A |
| Polymeráza | Taq DNA polymeráza |
| Formát reakcie | SuperMix alebo Master Mix |
| Rýchlosť reakcie | Štandardné |
| typ produktu | PCR Master Mix (2×) |
Inštrukcie
1.Reakčný systém
| Komponenty | Veľkosť (μL) |
| DNA šablóny | Vhodné |
| Primer 1 (10 μmol/l) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/l) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | Do 50 |
2.Amplifikačný protokol
| Cyklujte kroky | Teplota (°C) | čas | Cykly |
| Preddenaturácia | 94 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturácia | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Žíhanie | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Rozšírenie | 72 ℃ | 30-60 s/kb | |
| Záverečné predĺženie | 72 ℃ | 10 min | 1 |
Poznámky:
1) Použitie šablóny: 50-200 ng genómovej DNA;0,1-10 ng plazmidovej DNA.
2) Mg2+koncentrácia: Tento produkt obsahuje 3 mM MgCl2 vhodný pre väčšinu PCR reakcií.
3) Teplota žíhania: Pozrite si teoretickú hodnotu Tm primerov.Teplotu žíhania je možné nastaviť o 2-5 ℃ nižšiu ako je teoretická hodnota základného náteru.
4) Čas predĺženia: Na molekulárnu identifikáciu sa odporúča 30 sekúnd/kb.Pre klonovanie génov, 60sek/kb sa odporúča.
Poznámky
1.Pre vašu bezpečnosť a zdravie noste pri prevádzke laboratórne plášte a jednorazové rukavice.
2.Len na výskumné účely!
